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CPHI制藥在線(xiàn) 資訊 小泥沙 從MIPs談分子印跡技術(shù)在藥物分析中的應用

從MIPs談分子印跡技術(shù)在藥物分析中的應用

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作者:小泥沙  來(lái)源:CPhI制藥在線(xiàn)
  2019-04-23
MIPs在臨床藥物分析的發(fā)展方向可能出現在以下幾個(gè)方面:如合成具有更高選擇性、高容量的MIPs材料;對水溶液中成分的直接檢測,尤其是對蛋白質(zhì)、細菌、激素、毒素等大分子的檢測;以及商業(yè)化MIPs材料(如試劑盒、固相萃取柱等)的開(kāi)發(fā)與推廣。

       分子印跡

       分子印跡技術(shù)起源于生物免疫學(xué),是一種依賴(lài)于抗原與抗體特異性識別原理制備聚合物(MIPs)以實(shí)現分子精準識別的技術(shù)。MIPs是一種能夠對特定的目標分子及其結構類(lèi)似物特異性識別和分離的高分子聚合物,它不僅對目標分子具有與生物抗體類(lèi)似的高選擇性,而且具有較好的化學(xué)穩定性和機械強度,因此廣泛地應用于環(huán)境分析、食品分析、藥物分析等領(lǐng)域。

       分子印跡以目標分子為模板分子,選擇匹配的功能單體通過(guò)共價(jià)、非共價(jià)等與模板分子鍵合,形成單體-模板復合物。復合物在合適的交聯(lián)劑、引發(fā)劑等條件下反應形成高度交聯(lián)的聚合物。聚合物在洗去模板分子后,即可得到與模板分子空間結構相似、對目標分子能特異性結合的立體識別位點(diǎn)的吸附劑。該吸附劑可憑"記憶"選擇吸附復雜基質(zhì)中的特定分子,達到對目標分子的分離富集。

       根據模板分子與功能單體間的鍵合作用,目前主要有共價(jià)法、非共價(jià)法,準共價(jià)法和金屬離子印跡方法。共價(jià)印跡法是指模板分子與功能單體以共價(jià)鍵結合,其結構穩定,特異性高。但制備過(guò)程繁瑣,模板分子難以洗脫下來(lái),回收利用時(shí)也難達到熱力學(xué)平衡,所以關(guān)于共價(jià)型分子印跡聚合比較少利用。非共價(jià)印跡法與共價(jià)印跡法相比,模板分子與功能單體主要以氫鍵、疏水作用、范德華力等非共價(jià)鍵結合,其中氫鍵應用最為廣泛。其合成簡(jiǎn)單,操作靈活,氫鍵作用形成較弱,結合、解離速率快,模板易洗脫,吸附迅速,適用性強。但因結合位點(diǎn)作用強度不均容易造成非特異性吸附,從而降低選擇性。準共價(jià)印跡法是共價(jià)法與非共價(jià)法兩種方法的結合,即模板分子與功能單體以共價(jià)鍵合,吸附識別以非共價(jià)作用力結合,所以既有共價(jià)法結合位點(diǎn)均一、選擇性強又有非共價(jià)法吸附結合迅速、適用廣泛的優(yōu)點(diǎn)。金屬離子印跡法主要依賴(lài)螯合、絡(luò )合等金屬配位作用,以不飽和軌道的金屬在配位層接受O、S、N等配位原子的孤對電子形成分子印跡,配合物的穩定性決定了印跡過(guò)程是屬于共價(jià)型還是非共價(jià)型。

       以MIPs 材料為基礎的各種樣品前處理新方法已逐漸應用于分析化學(xué)各領(lǐng)域中,如基于MIPs的手性分析、固相萃取、固相微萃取、磁性固相萃取、傳感器和酶聯(lián)免疫分析等。分子印跡的核心在于模板分子的識別與分離,MIPs 材料的空腔位點(diǎn)可對特定的模板分子進(jìn)行可逆性的識別和分離,通過(guò)高選擇性消除干擾是其最重要的特征。因此MIPs 與液相色譜、氣相色譜、毛細管電泳聯(lián)用可大大簡(jiǎn)化分析過(guò)程,避免基質(zhì)干擾效應,從而顯著(zhù)改善實(shí)驗效果。當前,對純對映體及消旋體的生物活性和**研究熱點(diǎn)促進(jìn)了手性分子分離技術(shù)的發(fā)展。與傳統色譜法相比,分子印跡技術(shù)避免了手性固定相價(jià)格高昂,極易污染,手性流動(dòng)相選擇小,手性衍生化操作繁瑣易產(chǎn)生副產(chǎn)物,適應性差等的缺點(diǎn)。固相萃取是MIPs最廣泛的應用,相應的研究報道較多。如以甲基丙烯酸(MAA)、二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)、2,2-偶氮二異丁 腈(AIBN)和文拉法辛(VEN)作為致孔劑溶劑、單體、交聯(lián)劑、引發(fā)劑和模板,通過(guò)非共價(jià)沉淀聚合法制備MIPs 并用于抑郁癥患者血漿樣本中VEN及其代謝產(chǎn)物的UHPLC-MS/MS分析。將固相微萃取和MIPs技術(shù)相結合,如MIPs單體/涂層/管內/溶膠凝膠-SPME等,可制備出高機械學(xué)穩定性和熱穩定性的材料用于臨床樣品分析。分子印跡傳感器則具有選擇性強、靈敏度高、價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn)。表面印跡聚合是在固相表面形成結合位點(diǎn),該技術(shù)制備的聚合物吸附容量大,吸附、解吸迅速,傳質(zhì)快,很好地彌補了傳統印跡制備方法的缺陷。由于MIPs表現出的接近天然抗體對抗原的高度親和性和專(zhuān)一性,因此以MIPs替代生物抗體用于藥物的免疫分析也是MIPs的一個(gè)重要應用方向。

       目前,雖然MIPs還有諸如交叉反應、傳質(zhì)系數低、重復性較差、制作成本高等缺點(diǎn),但MIPs的發(fā)展前景較好,相信以后將更廣泛地應用于臨床藥物分析工作之中。MIPs在臨床藥物分析的發(fā)展方向可能出現在以下幾個(gè)方面:如合成具有更高選擇性、高容量的MIPs材料;對水溶液中成分的直接檢測,尤其是對蛋白質(zhì)、細菌、激素、毒素等大分子的檢測;以及商業(yè)化MIPs材料(如試劑盒、固相萃取柱等)的開(kāi)發(fā)與推廣。

       參考文獻:

       [1] 何玉琴. 分子印跡技術(shù)在藥物分析中的應用[J]. 中西醫結合心血管病電子雜志, 2017(30):102-102..

       [2] 謝靜,王甜甜,熊靜,丁立生,梁健,周璐煒,青琳森.分子印跡聚合物的制備及其在臨床藥物分析中的應用進(jìn)展[J].中國醫院藥學(xué)雜志,2019,39(04):407-411.

       作者簡(jiǎn)介:小泥沙,食品科技工作者,畢業(yè)于華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,食品科學(xué)碩士,現就職于國內某大型藥物研發(fā)公司,從事?tīng)I養食品的開(kāi)發(fā)與研究。

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