人生長(cháng)激素（hGH）是由腦垂體前葉中的生長(cháng)激素細胞合成、存儲和分泌的一種肽類(lèi)激素，主要生理功能為促進(jìn)身體各組織、器官及骨骼中受體細胞的蛋白質(zhì)合成和脂肪分解，從而調節機體代謝和生長(cháng)發(fā)育，是人體內最重要的促進(jìn)生長(cháng)的激素。20世紀80年代末期，研究者們利用基因重組技術(shù)，獲得了氨基酸序列及組成與天然人生長(cháng)激素完全相同的重組人生長(cháng)激素（rhGH），逐漸成為治療各種生長(cháng)激素缺乏癥及并發(fā)癥的首選藥物。

       作為一種多肽分子，rhGH存在穩定性差、易失活或分解、體內半衰期短等問(wèn)題。目前臨床使用的rhGH凍干粉針制劑或水針制劑均需長(cháng)期頻繁皮下或肌肉注射給藥，注射部位常出現疼痛紅腫、皮下硬結和脂肪萎縮等副作用。在制劑生產(chǎn)和運輸過(guò)程中，rhGH分子也容易受不當干燥方式和路途顛簸等因素的影響而失去藥物活性。因此，開(kāi)發(fā)新型rhGH給藥系統有著(zhù)極其重要的研究意義和臨床價(jià)值。

       目前新型rhGH給藥系統研究主要集中在兩個(gè)方向：①通過(guò)對rhGH進(jìn)行化學(xué)修飾、構建融合蛋白、構建rhGH緩釋微球給藥系統等方法，延長(cháng)rhGH體內半衰期，實(shí)現長(cháng)效治療，降低注射頻率；②開(kāi)發(fā)rhGH新型給藥方式以避免注射，主要包括經(jīng)皮給藥、肺部給藥和鼻腔黏膜給藥。

       1. rhGH長(cháng)效制劑

       1.1 化學(xué)修飾

       對rhGH進(jìn)行化學(xué)修飾，增加其分子量、表觀(guān)尺寸等理化性質(zhì)，可以降低rhGH的腎 臟清除率，延長(cháng)其體內半衰期，實(shí)現長(cháng)效治療。目前，研究最多的是利用聚乙二醇（PEG）及其衍生物通過(guò)共價(jià)鍵方式對rhGH進(jìn)行結構修飾。這是由于PEG是一種具有生物惰性且無(wú)免疫原性的線(xiàn)性大分子聚合物，對rhGH進(jìn)行PEG化修飾，可以避免rhGH被網(wǎng)狀內皮系統攝取，并且其經(jīng)腎 臟過(guò)濾后，清除率較低。

       金賽增：金賽增是我國長(cháng)春金賽藥業(yè)研發(fā)的PEG化rhGH長(cháng)效制劑，為rhGH與分支型PEG組成的共價(jià)偶聯(lián)物。在I期臨床試驗中，患有GHD的兒童單次給藥后，IGF-Ⅰ水平升高并能持續一周，與每日持續注射rhGH沒(méi)有顯著(zhù)差異。在對健康成人進(jìn)行單劑量給藥的耐受性試驗和藥代動(dòng)力學(xué)試驗中，在測試的所有劑量水平下，受試者均表現出良好的耐受性，并具有更長(cháng)的半衰期和較低的血漿清除率，且無(wú)明顯的rhGH蓄積。金賽增于2014年被原國家食品藥品監督管理總局批準上市，成為全球首支上市的PEG化學(xué)修飾的長(cháng)效rhGH注射液。

       PEG化修飾rhGH技術(shù)已經(jīng)較為成熟，但仍然存在一些問(wèn)題。例如，對rhGH進(jìn)行PEG修飾時(shí)，可被修飾的位點(diǎn)較多，從而增大了純化難度，增加了生產(chǎn)成本；PEG化修飾在延長(cháng)rhGH體內作用時(shí)間的同時(shí)會(huì )阻礙其與受體的結合，使rhGH活性降低。

       1.2 融合蛋白

       通過(guò)基因工程等技術(shù)，選用半衰期較長(cháng)、分子量較大的蛋白分子為載體與rhGH構建具有雙重功能的融合蛋白，可以減少rhGH與受體的結合數量，降低受體介導的清除效應。國內外多家制藥公司對rhGH融合蛋白開(kāi)展了研發(fā)，包括將rhGH與白蛋白、免疫球蛋白片段、GH受體的細胞外GH結合蛋白片段、人絨毛膜促性腺激素C端肽等融合，

       Sogroya：諾和諾德的Sogroya是FDA批準的首 個(gè)新型的長(cháng)效rhGH制劑。Sogroya由天然hGH修飾具有非共價(jià)白蛋白結合特性的脂肪酸部分的側鏈，能夠可逆地、廣泛地與內源性循環(huán)白蛋白結合，延遲rhGH的消除效應，從而延長(cháng)作用時(shí)間。FDA于2020年9月批準其用于成人生長(cháng)激素缺乏癥（AGHD）。2020年10月在中國獲批IND，受理號為CXSL2000184、CXSL2000185。

       融合蛋白在保留治療性蛋白生物活性的同時(shí)也具有一些抗體的性質(zhì)，rhGH融合的蛋白片段是否會(huì )導致一些尚未發(fā)現的細胞**等副作用仍需要進(jìn)行長(cháng)期監測。除此之外，融合蛋白表達量低、分離純化復雜、價(jià)格高昂等問(wèn)題也限制著(zhù)其進(jìn)一步發(fā)展。

       1.3 緩釋微球

       將蛋白類(lèi)藥物吸附或分散在可生物降解的高分子材料中，制備成粒徑為1~300μm的球狀微粒，在體液的溶蝕作用和藥物濃差推動(dòng)作用下，可以實(shí)現蛋白類(lèi)藥物的緩慢釋放。目前已研究報道的rhGH緩釋微球主要以乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）、聚乳酸（PLA）、透明質(zhì)酸（HA）等高分子作為微球骨架材料。

       Nutropin Depot是由美國Genentech公司開(kāi)發(fā)的第一個(gè)PLGA緩釋微球為載體的rhGH長(cháng)效制劑，于1999年獲FDA批準?？蓪?shí)現一個(gè)月的持續釋放。但是Nutropin Depot不良反應為注射后疼痛，注射部位產(chǎn)生結節和紅斑。并且后續研究發(fā)現存在感染和蛋白質(zhì)降解等問(wèn)題，該產(chǎn)品于2004年退市。

       Declage（成人）/Eutropin Plus（兒童）是LG公司推出的以HA緩釋微球為載體的rhGH長(cháng)效制劑，分別在2007、2009年上市，用于兒童生長(cháng)激素缺乏癥（PGHD）、Turner 綜合征（TS）、宮內發(fā)育遲緩（IUGR）、特發(fā)性矮?。↖SS）、Prader-Willi綜合征（PWS）、兒童腎功能衰竭，在中國獲批適應證為PGHD、AGHD和TS。

       2. 非注射給藥途徑

       目前，研究最多的新型給藥途徑主要包括經(jīng)皮給藥、肺部給藥和鼻腔黏膜給藥。

       經(jīng)皮給藥：經(jīng)皮給藥具有方便安全、可控釋藥、血藥濃度穩定等特點(diǎn)，在藥物遞送領(lǐng)域具有顯著(zhù)優(yōu)勢和應用潛力。蛋白類(lèi)藥物由于具有相 對較大的分子尺寸，很難直接跨過(guò)皮膚角質(zhì)層屏障而被吸收，為了解決這一問(wèn)題，研究者們開(kāi)發(fā)了包括使用微針技術(shù)、離子導入、吸收促透劑和超聲導入等各種經(jīng)皮給藥促透技術(shù)，促進(jìn)蛋白類(lèi)藥物的經(jīng)皮吸收。

       肺部給藥：早期研究表明，將rhGH直接注入到成年大鼠下呼吸道中，通過(guò)肺后生物利用度可達36%，這顯示出了肺作為rhGH給藥途徑的潛力。隨后，rhGH被制成溶液氣霧劑、干粉等劑型用于肺部給藥。但是由于肺部給藥對rhGH的粒徑和粒徑分布要求較高，同時(shí)粒徑分布不均勻則會(huì )造成rhGH吸入過(guò)程中的損失。除此之外，長(cháng)期肺部給藥可能導致肺纖維化等副作用。因此，rhGH肺部給藥途徑雖然是一種安全可行的方式，但其仍處于臨床試驗或實(shí)驗室研究階段。

       鼻腔黏膜給藥：鼻腔黏膜由于具有黏膜層薄、有效吸收面積大、蛋白水解酶濃度低等性質(zhì)而成為蛋白類(lèi)藥物的有效給藥途徑之一。鼻腔黏膜給藥后，rhGH可以通過(guò)黏膜中豐富的毛細血管直接進(jìn)入血液循環(huán)系統，避免肝 臟首過(guò)效應，但由于rhGH相 對分子質(zhì)量較大和鼻腔黏膜纖毛的清除作用限制了rhGH吸收，通常需加入各種吸收促進(jìn)劑來(lái)增加吸收。但是，吸收促進(jìn)劑對鼻腔黏膜存在一定的**，采用rhGH鼻腔黏膜給藥的生物利用度仍然較低。

       對于rhGH新型給藥系統，PEG化學(xué)修飾、構建融合蛋白和緩釋微球等長(cháng)效化方法可以有效增加rhGH的體內循環(huán)時(shí)間，改善其藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)性質(zhì)，獲得較好的長(cháng)效治療效果。新型的經(jīng)皮給藥、肺部給藥和鼻腔黏膜給藥等非注射型給藥途徑，可以規避長(cháng)期注射帶來(lái)的注射部位紅腫、皮下硬結和脂肪萎縮等問(wèn)題。目前雖然已經(jīng)有商品化rhGH長(cháng)效注射制劑在一些國家獲得了上市許可，但頻繁注射給藥帶來(lái)的各種問(wèn)題仍未得到解決。將rhGH長(cháng)效化與非注射給藥途徑合理結合應成為將來(lái)實(shí)現rhGH高效遞送的重要研究方向。

       參考文獻：

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       作者簡(jiǎn)介：沙羅，中藥研發(fā)工作者，現就職于國內某大型藥物研發(fā)公司，致力于中藥新藥的研究開(kāi)發(fā)。