近日，廈門(mén)特寶生物（Amoytop）宣布與Aligos Therapeutics達成協(xié)議，擬利用后者的核酸技術(shù)開(kāi)展在肝炎治療領(lǐng)域的研究。

       根據協(xié)議條款，特寶生物和Aligos將合作研究和開(kāi)發(fā)用于治療肝 臟疾病的寡核苷酸化合物（siRNA）。特寶生物將獲得獨家許可，在大中華地區開(kāi)發(fā)和商業(yè)化產(chǎn)品，而Aligos將保留世界其他地區的權利。Aligos還將獲得預付款和研究合作資金，并有資格獲得總計1.09億美元的許可產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和銷(xiāo)售里程碑付款以及凈銷(xiāo)售額的分層特許權使用費。

       siRNA研發(fā)進(jìn)展

       上世紀90年代初，RNA干擾（RNAi）現象首次在植物中被發(fā)現。1998年，研究人員在秀麗線(xiàn)蟲(chóng)中同樣觀(guān)察到抑制同源基因活性的雙鏈RNA效應，并把這種現象命名為RNAi。2006年，這一發(fā)現榮獲了諾貝爾醫學(xué)獎，并激發(fā)了全球小核酸藥物研發(fā)的熱潮。

       小核酸藥物具有靶點(diǎn)豐富、合成方便、研發(fā)周期短、不良反應可控等優(yōu)勢，引起了人們廣泛關(guān)注。siRNA（小干擾RNA）作為RNAi藥物的重要形式，其作用機理為：長(cháng)雙鏈RNA和復雜的發(fā)夾前體被核糖核酸內切酶分解為siRNA雙鏈片段，隨后雙鏈siRNA被拆分成過(guò)客鏈和引導鏈。在RNAi作用過(guò)程中，引導鏈與Argo蛋白家族中的Argo2在細胞質(zhì)內結合形成siRNA誘導沉默復合體（RISC），過(guò)客鏈隨后被降解。在鎂離子和ATP的參與下，RISC被激活與靶標mRNA的同源區進(jìn)行特異性結合，結合的mRNA被切割和降解，從而抑制或影響靶基因的表達，導致靶蛋白的表達水平降低。

       siRNA沉默通路

圖片來(lái)源：Nature Reviews Drug Discovery

       siRNA藥物目前主要應用于腫瘤和罕見(jiàn)病，目前已有多種針對罕見(jiàn)病的siRNA藥物獲批上市，如Patisiran（治療遺傳性轉甲狀腺素蛋白淀粉樣變性疾?。?、Exondys51（杜氏肌營(yíng)養不良）、Spinraza（脊髓性肌萎縮癥）等。在腫瘤治療領(lǐng)域，也有多種抗癌siRNA藥物進(jìn)入臨床試驗。

       除了腫瘤和罕見(jiàn)病外，近年來(lái)，siRNA藥物也在向普通疾病發(fā)力，如乙肝、眼部疾病、腎病等。其中siRNA技術(shù)的出現，為實(shí)現乙肝的功能性治愈，提供了強有力的工具。

       siRNA在乙肝治療領(lǐng)域的應用

       乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的乙肝是全球公共衛生的重要威脅。據世界衛生組織發(fā)布的數據顯示，目前全球有超過(guò)3億人感染HBV，每年約有60萬(wàn)人死于HBV導致的肝 臟疾病。在國內，慢性乙肝患者多達2800萬(wàn)人，大多數未接受正規治療。

       功能性治愈一直是乙肝治療的理想目標。它是指停止治療后仍保持HBsAg（乙肝表面抗原）陰性、乙肝病毒DNA檢測不到、肝 臟生物化學(xué)指標正常、肝 臟組織病變改善。

       HBsAg是HBV的外殼蛋白，是實(shí)現乙肝功能性治愈的關(guān)鍵標志物。研究顯示，HBsAg轉陰與肝硬化甚至肝癌風(fēng)險的降低密切相關(guān)。目前，國內外指南推薦的乙肝治療臨床一線(xiàn)用藥主要是核苷類(lèi)藥物，包括拉米夫定、恩替卡韋、替比夫定和丙酚替諾福韋等，它們借助HBV逆轉錄酶整合嵌入病毒DNA，通過(guò)阻止病毒DNA的復制，達到降低HBV DNA水平的目的。不過(guò)這類(lèi)藥物只能控制病情，并不能清除病毒，一旦停藥就可能引起HBV病毒的反彈，甚至出現耐藥株。而且，核苷類(lèi)藥物對HBsAg沒(méi)有抑制效果，而較高的HBsAg 水平易誘導免疫耐受。

       因此，實(shí)現乙肝的功能性治愈存在巨大的未滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，一旦開(kāi)發(fā)出可實(shí)現乙肝功能性治愈的藥物，將具有不可估量的社會(huì )和經(jīng)濟價(jià)值。

       siRNA能夠通過(guò)RNAi技術(shù)來(lái)干擾乙肝病毒的mRNA，破壞其作為轉錄后的翻譯模板功能，從而阻止相關(guān)病毒蛋白如HBsAg、HBeAg（乙肝E抗原）等的合成，抑制病毒顆粒形成。目前進(jìn)入臨床階段的國內外采用siRNA技術(shù)治療乙肝的藥物如下：

部分在研乙肝siRNA藥物

來(lái)源：公開(kāi)資料

       AB-729

       AB-729是由Arbutus Biopharma Corporation研發(fā)的一款肝 臟靶向的候選RNAi療法，采用Arbutus的新型共價(jià)偶聯(lián)N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）遞送技術(shù)進(jìn)行肝靶向遞送。2022年7月，齊魯制藥與Arbutus公司宣布，雙方就乙肝治療藥物AB-729達成合作，齊魯制藥獲得AB-729在大中華區（包括中國大陸、香港、澳門(mén)、臺灣地區）的開(kāi)發(fā)和商業(yè)化權益，作為回報，Arbutus將獲得4000萬(wàn)美元的首付款以及高達2.45億美元的開(kāi)發(fā)、監管和銷(xiāo)售里程碑付款。另外，Arbutus公司還有權獲得兩位數的分層特許權使用費，及1500萬(wàn)美元的股權投資。

AB-729作用機理

來(lái)源：參考3

       臨床前研究顯示，AB-729可抑制HBV病毒復制，減少所有病毒RNA轉錄副本，并降低所有HBV抗原，并且顯示出HBV泛基因型活性。在Ib期研究中，AB-729使74%的患者HBsAg的滴度降到100IU/ml以下，治療48周后，降低幅度達1.9個(gè)Log值。目前，AB-729正在進(jìn)行一項II期試驗，旨在評估AB-729聯(lián)合Peg-IFNα-2a（聚乙二醇干擾素α-2a）在核苷類(lèi)似物（NA）抑制的慢性HBV感染受試者中的安全性和耐受性。

       JNJ-3989

       JNJ-3989是一款皮下給藥siRNA療法，可與其他直接抗病毒 藥物聯(lián)用靶向HBV，實(shí)現乙肝患者的功能性治愈。在2021年的美國肝病研究學(xué)會(huì )年會(huì )（AASLD2021）上，Johnson&Johnson公布了JNJ-3989 在IIb 期臨床 REEF-1研究中的數據。結果顯示，JNJ-3989 200mg + NA 組滿(mǎn)足停藥標準的患者比例最高，達到 29.7%。

       ALG-125755

       ALG-125755是一種靶向HBsAg的siRNA藥物，臨床前研究顯示，與其他可注射的HBsAg抑制劑相比，ALG-125755具有良好的耐受性，且以更低的給藥頻率持續降低HBsAg 水平。

       目前，Aligos公司正在進(jìn)行一項I/Ib期臨床試驗，以評估ALG-125755在健康受試者(第1部分)和慢性乙肝受試者(第2部分)單次遞增劑量，以及慢性乙肝受試者(第3部分)多劑量后的安全性、耐受性、藥代動(dòng)力學(xué)。

       HT-101

       HT-101是一款GalNAc偶聯(lián)的siRNA藥物。臨床前研究顯示，HT-101單次給藥后可顯著(zhù)降低HBsAg、HBeAg以及DNA水平，尤其是在降低乙肝表面抗原（S抗原）水平方面，更是有著(zhù)出色的表現，中、高劑量組均可以降低S抗原接近1000倍，并且藥效持續超過(guò)70天未見(jiàn)減弱。未來(lái)或將大大提高患者治療的依從性，同時(shí)也會(huì )降低治療成本。

       HRS-5635

       HRS-5635是恒瑞醫藥自主研發(fā)的siRNA藥物，臨床前研究顯示，HRS-5635對所有HBV基因型均顯示出優(yōu)異的抗病毒活性，在體內可以發(fā)揮高效、持久的抗病毒作用，而且HRS-5635無(wú)脫靶活性，安全性高。今年3月28日，HRS-5635臨床試驗申請獲CDE批準，開(kāi)展用于慢性乙肝患者的臨床試驗。

       小     結

       當下乙肝藥物開(kāi)發(fā)主要以HBsAg的持續清除作為衡量功能性治愈的主要參考指標，降低HBsAg是目前臨床治療的主要挑戰。siRNA技術(shù)是目前破除乙肝治療困境的最重要手段之一，未來(lái)一旦成功，將是乙肝治療范式的一大變革。

       參考來(lái)源

       1.Friedrich, M., Aigner, A.Therapeutic siRNA: State-of-the-Art and Future Perspectives. BioDrugs 36, 549–571 (2022). https://doi.org/10.1007/s40259-022-00549-3.

       2.劉義思, 陳新月. 治療慢性乙型肝炎新藥研發(fā)的研究進(jìn)展[J]. 臨床肝膽病雜志, 2022, 38(6): 1387-1392.

       3.Repeat dosing of the GalNAc-siRNA AB-729 in subjects with chronic hepatitis B results in robust and sustained HBsAg suppression. Retrieved June 27, 2021, from https://investor.arbutusbio.com/static-files/a7e1c49a-09eb-47a7-9e96-48fe9f7faef1.

       4.Arbutus and Qilu Pharmaceutical Enter into an Exclusive Licensing Agreement and Strategic Partnership to Develop and Commercialize AB-729. Retrieved Dec 13, 2021, from https://investor.arbutusbio.com/news-releases/news-release-details/arbutus-and-qilu-pharmaceutical-enter-exclusive-licensing.