自誕生以來(lái)，CRISPR-Cas9這把"基因魔剪"雖然掀起了生命科學(xué)研究的革命性浪潮。然而，面對那些"油鹽不進(jìn)"的難轉染細胞，特別是原代免疫細胞，這把基因魔剪卻常常無(wú)處施展。
現在，這個(gè)難題終于迎來(lái)突破性解決方案！西湖凝聚體攜手西湖大學(xué)研究團隊重磅推出ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯試劑盒。這款全球首個(gè)基于內源蛋白凝聚體的轉染試劑，采用先進(jìn)的mRNA遞送技術(shù)，開(kāi)創(chuàng )了非病毒、非電轉、非脂質(zhì)體的全新遞送策略，不受核酸大小限制，高效遞送Cas9 mRNA，讓原代免疫細胞這樣難轉染細胞的基因編輯不再是難題?；赑roteanFect進(jìn)行免疫細胞基因編輯的成果，也將在本周舉行的美國血液學(xué)會(huì )（ASH）年會(huì )上做口頭報道，期待與各位同行進(jìn)行交流。
圖1：使用ProteanFect CRISPRMax Cas9試劑盒在人原代T細胞和小鼠原代T細胞中實(shí)現高效基因編輯，基因編輯效率范圍為67%-88%。
CRISPR編輯系統遞送方式對比
突破性創(chuàng )新：基于ProteanFect內源蛋白遞送的mRNA-Based CRISPR Cas9技術(shù)
創(chuàng )新原理
面對現有遞送方法的種種局限，西湖凝聚體開(kāi)發(fā)出基于生物分子凝聚體的全新遞送技術(shù)——ProteanFect。這項技術(shù)的核心在于充分利用生物凝聚體的天然生物學(xué)機制：ProteanFect蛋白分子能夠在體外與核酸自組裝成高度規律的球體結構（見(jiàn)圖2）。
圖2：ProteanFect蛋白分子與mRNA可在體外自組裝形成蛋白納米顆粒。
這種自組裝而成的ProteanFect-核酸復合物能夠通過(guò)細胞的主動(dòng)攝入高效進(jìn)入細胞內，迅速釋放核酸分子，實(shí)現基因表達，同時(shí)天然降解其余蛋白（圖3）。
圖3：ProteanFect核酸遞送原理示意圖
ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯方式
1. 通過(guò)共轉染Cas9 mRNA與sgRNA，成功表達Cas9蛋白。
2. Cas9蛋白與sgRNA在細胞內自組裝形成RNP復合物。
3. RNP復合物進(jìn)入細胞核并實(shí)現高效基因編輯。
圖4：ProteanFect基因編輯方式原理示意圖
ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯卓越優(yōu)勢
高效性能- 轉染效率可達70%-95%，可同時(shí)遞送多種核酸，共表達率超90%，適用于人源和小鼠原代免疫細胞
卓越安全性- 非病毒、非電轉、非脂質(zhì)體設計 - 基于內源蛋白，生物相容性極 佳 - 顯著(zhù)降低細胞損傷
操作便捷- 標準化的實(shí)驗流程 - 無(wú)需復雜的預處理步驟 - 可重復性高
系統靈活 – 不受細胞數量限制，從103– 108次細胞都可以轉染
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