基于對行業(yè)需求的深刻洞察和多年技術(shù)積累，上?；煌瞥隽嗣庖呦到y與肝臟雙重人源化小鼠模型，將免疫系統和肝臟兩大維度的人源化技術(shù)融會(huì )貫通，為前臨床研究提供了前所未有的高保真平臺。

       雙重人源化小鼠模型選用 BRGSF (BALB/c-Rag2tm1FwaIl2rgtm1CgnSirpαNODFlk2tm1lrl) 小鼠作為基礎。這是一款高度免疫缺陷小鼠模型，適用于人源化免疫系統的重建。該小鼠缺失 Rag2 和 IL2rg 基因，導致 T、B 細胞及 NK 細胞完全缺失，同時(shí)攜帶 SirpαNOD 突變，提高了外源人源細胞的植入效率。此外，Flk2 基因敲除進(jìn)一步抑制小鼠自身的髓系細胞發(fā)育，為后續人源化免疫系統提供了更純粹的免疫缺陷微環(huán)境。

       該模型可以將高純度人臍帶血來(lái)源的 CD34? 細胞，注入到經(jīng)放射清髓處理后的 BRGSF 小鼠新生仔鼠，12-16周后，外周血中的 hCD45? 人源化程度可穩定達到 45% 以上，人源 T、B、NK 及髓系細胞譜系得到完整再建立。BRGSF 在人髓系細胞定植、免疫功能成熟和 GvHD 延遲發(fā)生方面，均表現出更自然、更穩定的優(yōu)勢。以此模型為基礎，旨在實(shí)現對人類(lèi)免疫系統更完整的重建。

       圖1. 在BRGSF小鼠上進(jìn)行免疫系統人源化重建流程

       在免疫缺陷鼠的基礎上，從理論與實(shí)際實(shí)行中對比下述的各種方法：

•        在 BRGSF 小鼠運用基因編輯技術(shù)將 FAH（富馬酰乙酰乙酸水解酶）基因敲除，通過(guò)NTBC（2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲?；?-1,3-環(huán)己二酮）來(lái)誘導肝損傷；
•        DPP-IV 抑制劑聯(lián)合碳四氯化物（CCl4）或阿霉素（Doxorubicin）誘導肝損傷；
•        利用慢病毒或 AAV 載體表達 shRNA 或 CRISPR-Cas9 系統，特異性敲低小鼠肝細胞增殖相關(guān)基因（如Mdm2）；
•        運用自主研發(fā)或者合作伙伴的藥物化合物來(lái)誘導肝損傷，并持續性的誘導肝細胞凋亡，減少對后續人源肝細胞的移植所產(chǎn)生的影響。

       最終采用最佳策略誘導肝損傷，用以控制肝細胞耗竭劑的基因表達，開(kāi)發(fā)一種特異性針對小鼠肝細胞的耗竭技術(shù)，對其他小鼠細胞類(lèi)型（及人類(lèi)肝細胞）無(wú)影響。且耗竭程序必須能夠以漸進(jìn)方式實(shí)現小鼠肝細胞的完全降解，以支持強效移植物存活。最終實(shí)現對小鼠自身肝細胞的周期性、定時(shí)耗竭，與人源肝細胞的高效定植相結合。

       圖2. 雙重人源化小鼠的構建流程示意圖

       基于免疫系統與肝臟雙重人源化，可以評估抗腫瘤抗體偶聯(lián)物（ADC）的 ADCC/ADCP 效應，還能同步監測肝臟藥代動(dòng)力學(xué)（PK）、代謝產(chǎn)物（CYP450、UGT、轉運蛋白）以及免疫相關(guān)毒性，實(shí)現對藥物全方位、一體化的前臨床評價(jià)。同時(shí)也可以通過(guò)病毒或者化學(xué)藥物誘導病毒性，自身免疫學(xué)肝炎模型，用以探究免疫系統及免疫細胞在肝炎中的作用機制。最終可以通過(guò)追蹤初級膽汁酸與次級膽汁酸的產(chǎn)出評估肝腸之間的代謝免疫的交流與調控。

       展望未來(lái)，上?；煌?lián)手 genOway 法國將繼續完善和迭代雙重人源化平臺，重點(diǎn)部署：

•        基因和細胞因子優(yōu)化：引入 hFLT3L、hGM-CSF、hIL-15、hBAFF 等支持多譜系髓系與淋巴系細胞功能；
•        多模態(tài)組學(xué)驗證：聯(lián)合單細胞 RNA-seq、空間組學(xué)、代謝組學(xué)與質(zhì)譜成像，真實(shí)解析免疫-肝臟互作機制；
•        國際合作與標準化：攜手 FDA/EMA 認可的 CRO 和學(xué)術(shù)機構共同制定人源化模型評價(jià)指南，推動(dòng)國際標準化；
•        臨床前解決方案拓展：圍繞腫瘤、代謝、感染、免疫等多疾病領(lǐng)域，提供定制化"模型+數據+咨詢(xún)"一體化服務(wù)，助力全球藥企和研發(fā)團隊加速創(chuàng )新轉化。

       肝臟疾病領(lǐng)域的未來(lái)，注定是人源化與智能化并行的時(shí)代。免疫系統與肝臟雙重人源化小鼠模型正是連接研發(fā)與臨床的那座堅實(shí)橋梁，讓每一款新藥在走進(jìn)臨床前，都擁有最貼近人體的預測能力。我們相信，在不遠的將來(lái)，基于這一平臺的前臨床數據，將成為制藥攻關(guān)的"金標準"，為全球肝臟疾病治療和精準醫療帶來(lái)真正革新。

       請關(guān)注 2025 年 6 月 27-28 日在蘇州舉辦的美國華人生物醫藥科技協(xié)會(huì ) CBA-China 中國年會(huì )，上?；煌y雙重人源化模型的更多細節，以及其他人源化小鼠模型，在 DT10 展臺恭候您的光臨。

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